1.目的:确保移液的精确性,正确使用移液器。 2.适用范围:本实验室使用的可调式移液器。
3.负责人: 操作人:
4.程序:
4.1移液器的使用
4.1.1转动旋钮设定移液量,设定的移液量不可超出该移液器规定的范围。
4.1.2装上配套的Tip。
4.1.3前进移液法
a) 将按钮压至第一停点位置;
b)将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处,然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后,将管嘴撤出液面,擦掉管嘴外侧的所有液滴。
c) 轻轻压下操作按钮至第一停点位置,放出液体。约1秒钟后,继续将操作按钮向下压至第二停点位置。待管嘴液体放干净后,将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中,撤出管嘴。
d)松开按钮使之回到起点位置。需要时,可更换管嘴继续移液操作。
4.1.4倒退移液法:适用于高粘度液体及/或易起泡沫液体的移液。
a) 将操作按钮向下压至第二停点位置。
b)将移液管管嘴浸入试剂瓶液面下2~3mm深处,然后慢慢松开钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后,将管嘴撤出液面,擦掉管嘴外侧的所有液滴。
c)轻轻压下操作按钮至第一停点位置,放出液体。
d)遗留在管嘴时的液体或者随管嘴一起扔掉,或者放回原来的容器中。
4.1.5重复操作法:重复操作移液法可以快速、简便地重复转移同体积的同种液体。
a)将操作按钮向下压至第二停点位置。
b)将移液管管嘴浸入液面下2~3mm深处,然后慢慢松开按钮吸入液体。待移入管嘴吸满液体后,将管嘴贴在容器瓶壁上防止形成液滴滴入瓶中。
c)轻轻压下操作按钮至第一停点位置,放出液体。待放完所需体积液体后,把按钮停在第一停点位置,不包括在移液量之内的少量液体仍留在管嘴内,管嘴外的液滴则需包括在移液量之内。
d)将管嘴浸入试剂液面下不远处,然后慢慢松开按钮使管嘴重新吸入液体。
e)重复步序c)和d)继续移液操作,就可重复转移相同体积液体。
4.2 移液器的维护
每天对使用过的移液器用75%酒精进行擦拭。每周1次对移液器咀进行75%酒精浸泡15分钟左右,若使用过程中发生污染应随时浸泡处理。
4.3移液器的校准
为确保移液器加样的精确性和准确性,正确使用移液器,需定期(一年)对移液器进行校准
4.3.1校准环境和用具要求
室温:20~25℃,测定中波动范围不大于±0.5℃。
电子天平:放置于无尘和震动影响的台面上,房间尽可能有空调。称量时,为保证天平内的湿度(相对湿度60~90%),天平内应放置一装有10mL蒸馏水的小烧杯。
小烧杯:5~10mL体积。
测定液体:温度为20~25℃的去气双蒸水。
选定校准体积:
a)拟校准体积;
b)移液器标定体积的中间体积。
c)最小可调体积(不小于拟定体积的10%)。
如为固定体积移液器,则只有一种校准体积。
4.3.2校准步骤
a)将移液器调至拟校准体积,选择合适的吸头;
b)调节好天平;
c)来回吸吹蒸馏水3次,以使吸头湿润,用纱布拭干吸头;
d)垂直握住移液器,将吸头浸入液面2~3mm,缓慢(1~3秒)一致地吸取蒸馏水
e)将吸头离开液面,靠在管壁,去掉吸头外部的液体;
f)将移液器以30℃角放入称量烧杯中,缓慢一致地将移液器压至第一档,等待1~3秒,再压至第二档,使吸头里的液体完全排出;
g)记录称量值;
h)擦干吸头外面;
i)按上步骤称量10次;
j)取10次测量值的均值作为最后移液器吸取的蒸馏水重量,按表1所列蒸馏水Z因子计算体积;
k)按校准结果调节移液器。
4.3.3比较校准法
利用经计量局校准并颁发校准报告之同型号移液器,在移液器量程范围的高低两个档各选择一个校准点,利用电子天平称量结果与已校准移液器称量结果进行比较,完成校准。
备注:连续可调移液器校准由本市标准计量局统一校准。
(表1 蒸馏水Z因子 hPa(mbar))
温度(℃) | 800 | 853 | 907 | 960 | 1013 | 1067 |
20 | 1.0026 | 1.0027 | 10.0027 | 1.0028 | 1.0029 | 1.0029 |
20.5 | 1.0027 | 1.0028 | 1.0028 | 1.0029 | 1.0030 | 1.0030 |
21 | 1.0028 | 1.0029 | 1.0030 | 1.0030 | 1.0031 | 1.0031 |
21.5 | 1.0030 | 1.0030 | 1.0031 | 1.0031 | 1.0032 | 1.0032 |
22 | 1.0031 | 1.0031 | 1.0032 | 1.0032 | 1.0033 | 1.0033 |
22.5 | 1.0032 | 1.0032 | 1.0033 | 1.0033 | 1.0034 | 1.0035 |
23 | 1.0033 | 1.0033 | 1.0034 | 1.0035 | 1.0035 | 1.0036 |
23.5 | 1.0034 | 1.0035 | 1.0035 | 1.0036 | 1.0036 | 1.0037 |
24 | 1.0035 | 1.0036 | 1.0036 | 1.0037 | 1.0038 | 1.0038 |
24.5 | 1.0037 | 1.0037 | 1.0038 | 1.0038 | 1.0041 | 1.0039 |
25 | 1.0038 | 1.0038 | 1.0039 | 1.0039 | 1.0040 | 1.0041 |